omega試劑(jì)盒具有敏感性(xìng)高 、特(tè)異性(xìng)強
、快(kuài)速等特(tè)點
，目前廣(guǎng)泛應(yīng)用(yòng)於農獸藥 、真菌(jūn)殘留檢(jiǎn)測 ，該方法(fǎ)從加樣 、洗板(bǎn)、顯色到(dào)讀數步驟繁多 ，其中任何一步控(kòng)制(zhì)不好都(dōu)可(kě)能影響檢(jiǎn)測結果的準確性(xìng) 。

 

　　今天要為(wéi)大家介紹的是omega試劑(jì)盒的兩種檢(jiǎn)測模式 ：

 

　　1、雙雜交探針模式(FRET)：FRET探針又稱雙雜交探針 ，FRET探針由兩條相鄰探針組成，在一條探針端(duān)標記FAM螢光基(jī)團(tuán)，另一探針端(duān)標記Red640螢光基(jī)團(tuán) 。當復性(xìng)時，探針結合在模板(bǎn)上，FAM基(jī)團(tuán)和Red640基(jī)團(tuán)相鄰 ，激發(fā)FAM產生的螢光，作為(wéi)Red640基(jī)團(tuán)的激發(fā)光被吸(xī)收 ，使Red640發(fā)出波長(zhǎng)為(wéi)640的螢光 。當變性(xìng)時 ，探針游離，兩基(jī)團(tuán)距離遠 ，不能產生640波長(zhǎng)的螢光。由於FRET探針是靠近發(fā)光 ，所以檢(jiǎn)測信號(hào)是實時信號(hào) ，非累積(jī)信號(hào) 。

 

　　2、交探針模式(Beacon)：分子信標是一種呈發(fā)夾結構的莖環寡核苷酸探針 ，兩端(duān)的核酸序列(liè)互(hù)補配對(duì) ，因此標記在一端(duān)的螢光基(jī)團(tuán)與標記在另一端(duān)的淬滅基(jī)團(tuán)緊緊靠近。螢光基(jī)團(tuán)被激發(fā)後產生的光子被淬滅劑(jì)淬滅 ，由螢光基(jī)團(tuán)產生的能量以紅外(wài)而(ér)不是可(kě)見光形式釋放出來(lái)
。分子信標的莖環結構中 ，環一般為(wéi)15-30個核苷酸長(zhǎng)，並與目標序列(liè)互(hù)補 ；莖一般5-7個核苷酸長(zhǎng) ，並相互(hù)配對(duì)形成莖的結構 。螢光基(jī)團(tuán)標記在探針的一端(duān)，而(ér)淬滅劑(jì)則標記在另一端(duān)。在復性(xìng)溫度下(xià)，因為(wéi)模板(bǎn)不存在時形成莖環結構 ，當加熱(rè)變性(xìng)會互(hù)補配對(duì)的莖環雙鏈(liàn)解(jiě)開 ，如果有模板(bǎn)存在環序列(liè)將與模板(bǎn)配對(duì)。與模板(bǎn)配對(duì)後，分子信標將成鏈(liàn)狀而(ér)非發(fā)夾狀 ，使得螢光基(jī)團(tuán)與淬滅劑(jì)分開。當螢光基(jī)團(tuán)被激發(fā)時 ，因淬滅作用(yòng)被解(jiě)除，發(fā)出激發(fā)光子 。由於是酶切作用(yòng)的存在，分子信標也是積(jī)累螢光 。