對於cck8試(shì)劑的使用相比於多(duō)用戶(hù)都充滿了疑惑 ，在實驗(yàn)的過程中也經常(cháng)會(huì)遇到一些難題，寸步難行 ，今天呢小編就總結下(xià)實驗(yàn)中客(kè)戶(hù)常(cháng)見問題相關疑問解答供大家參(cān)考(kǎo)下(xià)吧

1.cck8試(shì)劑與胸苷結合檢(jiǎn)測之間(jiān)是否有相關性 ？

有。然而，請注意由於cck8試(shì)劑使用的檢(jiǎn)測原理與胸苷檢(jiǎn)測的不同 ，因(yīn)此結果可能(néng)不同。

2.cck8試(shì)劑能(néng)否檢(jiǎn)測細(xì)菌細(xì)胞 ？

可以檢(jiǎn)測E.coli
，但不能(néng)檢(jiǎn)測酵母細(xì)胞。向100 μl E.coli培養(yǎng)液中加入10 μl cck8試(shì)劑溶液，並(bìng)培養(yǎng)1-4個(gè)小時或guo夜 。

3.cck8試(shì)劑穩定嗎？

cck8試(shì)劑在0-5℃下(xià)能(néng)夠保存(cún)至(zhì)少6個(gè)月 ，在-20℃下(xià)避光可以保存(cún)1年 。如果需要長(zhǎng)期保存(cún)，我們(men)推薦-20℃的儲(chǔ)藏條件 。

4.如果沒有450 nm的濾光片，還可以使用哪些其他濾光片？

還可使用450 nm到490 nm之間(jiān)的濾光片。

5.如何(hé)減少由於cck8試(shì)劑在槍頭上或孔壁上的殘留所(suǒ)帶來的誤差 ？

可以在加樣(yàng)前用培養(yǎng)基稀釋cck8試(shì)劑並(bìng)混勻(yún)後加樣(yàng)。

6.cck8試(shì)劑是什(shén)麼(me)顏色 ？

應該是粉(fěn)紅(hóng)色。若顏色不一樣(yàng) ，有可能(néng)會(huì)影響(xiǎng)測定 。

7.CCK8能(néng)否對活細(xì)胞進行染色？

不能(néng)
。因(yīn)為(wéi)CCK8的主要成分(fèn)是一種水(shuǐ)溶性的四唑鹽 (WST8)，並(bìng)通過電(diàn)子(zǐ)載(zài)體(tǐ)1Methoxy PMS將活細(xì)胞中的電(diàn)子(zǐ)交換到培養(yǎng)基中的WST8上 。由於生成的甲ā也是高(gāo)度(dù)水(shuǐ)溶性的 ，因(yīn)此CCK8不能(néng)對細(xì)胞進行染色 。

8.CCK8檢(jiǎn)測溶液對細(xì)胞是否有毒？

CCK8溶液自身(shēn)因(yīn)為(wéi)高(gāo)濃度(dù)的1Methoxy PMS的存(cún)在而具有一點毒性。但是 ，加到培養(yǎng)基中的CCK8是沒有毒性的 ，因(yīn)為(wéi)被稀釋了10倍。因(yīn)此，長(zhǎng)時間(jiān)的培養(yǎng)，如隔夜或者培養(yǎng)數天是可以的 。同一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)液在CCK8檢(jiǎn)測後還可以用於其他細(xì)胞增殖檢(jiǎn)測 ，如結晶紫檢(jiǎn)測，中性紅(hóng)檢(jiǎn)測或者DNA螢光檢(jiǎn)測等
。由於每種細(xì)胞對於CCK8的耐(nài)受(shòu)力(lì)都不同 ，因(yīn)此在需要進行長(zhǎng)時間(jiān)培養(yǎng)時 ，先(xiān)檢(jiǎn)測一下(xià)細(xì)胞在加入CCK8培養(yǎng)後的活力(lì)。

9.在做加藥實驗(yàn)時 ，藥物對測定是否有影響(xiǎng) ？如何(hé)解決？

有時會(huì)有影響(xiǎng) 。如果藥物具有還原性，會(huì)和(hé)CCK8發生顯(xiǎn)色反應，增加吸(xī)光度(dù) 。解決辦法 ：首先(xiān)要確認藥物是否有吸(xī)收，在含有藥物的培養(yǎng)基中加入CCK8 ，測定450 nm的吸(xī)光度(dù) ，如果它的吸(xī)光度(dù)比不含藥物的培養(yǎng)基 (加CCK8)的吸(xī)光度(dù)高(gāo)，則(zé)證(zhèng)明藥物有影響(xiǎng)，可在加CCK8之前更換培養(yǎng)基，去掉藥物的影響(xiǎng) 。

10.每次測定的數值不一樣(yàng) ，是什(shén)麼(me)原因(yīn) ？如何(hé)解決 ？

可能(néng)會(huì)有以下(xià)幾個(gè)原因(yīn)： 1. 當(dāng)在培養(yǎng)箱內培養(yǎng)時 ，培養(yǎng)板zui外一圈的孔zui容易乾燥揮發，由於體(tǐ)積不準確而增加誤差。 一般情(qíng)況下(xià)，zui外一圈的孔只加培養(yǎng)基，不作為(wéi)測定孔用。 2. 有可能(néng)會(huì)因(yīn)為(wéi)CCK8沾在壁上而產生誤差 ，建議在加入CCK8後 ，輕(qīng)輕(qīng)敲擊培養(yǎng)板以幫助混勻(yún) 。 3. 每孔的細(xì)胞數量過多(duō)或過少
。請預先(xiān)在1,000100 ,000個(gè)/孔範圍內摸索條件 。

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