專用(yòng)血清能(néng)為(wéi)細(xì)胞提(tí)供必要的(de)營養和生長因子,促進細(xì)胞生長和增殖
,常(cháng)被用(yòng)於(yú)細(xì)胞培(péi)養、免(miǎn)疫學實(shí)驗、生物化學實(shí)驗以及(jí)藥(yào)理學和毒理學實(shí)驗等
。在儲存時(shí),通(tōng)常(cháng)需要將其置於(yú)-15℃至-20℃的(de)環境中(zhōng),以保持(chí)其活(huó)性和穩定性。
專用(yòng)血清在使用(yòng)過(guò)程中(zhōng)可能(néng)會遇到(dào)問題(tí),這些問題(tí)可能(néng)會影(yǐng)響實(shí)驗結果的(de)準確(què)性和重復性
。以下(xià)是幾種常(cháng)見的(de)問題(tí)及(jí)其相應的(de)解決方法
。

1
、沈澱(diàn)現象
問題(tí)描述:
在儲存或使用(yòng)過(guò)程中(zhōng)
,有時(shí)會發現血清中(zhōng)出現不溶性的(de)沈澱(diàn)物。這通(tōng)常(cháng)不會影(yǐng)響質量,但可能(néng)會引起擔憂。
解決方法:
適當處(chù)理:輕微的(de)沈澱(diàn)可以通(tōng)過(guò)緩慢解凍後輕輕搖(yáo)晃來分散
。如果沈澱(diàn)較多
,可以將血清加熱至56°C並持(chí)續30分鐘(zhōng)進行滅活(huó)處(chù)理
,之(zhī)後再通(tōng)過(guò)過(guò)濾去除沈澱(diàn)
。
避免(miǎn)反復凍融
:盡量減少血清的(de)反復凍融次數
,因為(wéi)每次凍融都會增加沈澱(diàn)形成的(de)可能(néng)性。
2、細(xì)胞生長不良
問題(tí)描述:
即使添加了適量的(de)血清
,細(xì)胞仍然表(biǎo)現出生長遲緩或形態異常(cháng)的(de)現象。
解決方法:
檢查血清質量:確(què)認所使用(yòng)的(de)血清是否符合預期的(de)質量標準,特別是內毒素水平、總蛋白含量等關(guān)鍵指(zhǐ)標
。
優化培(péi)養條件
:根(gēn)據具體的(de)細(xì)胞類型調整血清濃度,有時(shí)需要嘗試不同的(de)比例(lì)以找到(dào)適合的(de)條件。此外
,確(què)保培(péi)養環境(如溫度、pH值)處(chù)於(yú)良好狀(zhuàng)態也很重要
。
3、內毒素污染
問題(tí)描述
:
高水平的(de)內毒素會導致細(xì)胞毒性,抑制(zhì)細(xì)胞增殖甚至導致細(xì)胞死亡。
解決方法:
選擇低內毒素血清
:在購買時(shí)優先選擇經(jīng)過(guò)嚴格檢測且標明低內毒素水平的(de)產(chǎn)品
。
額外處(chù)理
:如果懷疑存在內毒素污染,可以考慮採用(yòng)超濾或其他物理化學方法進一步降低內毒素含量
。
4、pH值不穩定
問題(tí)描述:
某些情況下(xià)
,它(tā)可能(néng)導致培(péi)養基pH值波動,影(yǐng)響細(xì)胞健康。
解決方法:
緩衝系(xì)統調整
:使用(yòng)適當的(de)緩衝體系(xì)(如HEPES)可以幫助穩定pH值。
定期監測
:定期檢查培(péi)養基的(de)pH值
,並根(gēn)據需要調整CO2濃度或更換新鮮培(péi)養基
。
5、微生物污染
問題(tí)描述:
儘管(guǎn)大多數商(shāng)業化的(de)產(chǎn)品都經(jīng)過(guò)嚴格的(de)無(wú)菌處(chù)理,但仍有可能(néng)發生微生物污染的(de)情況
。
解決方法
:
加強無(wú)菌操作:在處(chù)理血清及(jí)配(pèi)制(zhì)培(péi)養基時(shí)嚴格執行無(wú)菌技術
,減少外界污染的(de)風險。
二次過(guò)濾
:對(duì)於(yú)特別敏感的(de)實(shí)驗,可以在加入細(xì)胞前對(duì)含血清的(de)培(péi)養基進行0.2微米過(guò)濾除菌。
專用(yòng)血清通(tōng)過(guò)瞭解這些常(cháng)見問題(tí)及(jí)其解決方案,研究人員可以更好地應對(duì)在使用(yòng)過(guò)程中(zhōng)遇到(dào)的(de)各種挑戰(zhàn),從而保證(zhèng)實(shí)驗順利(lì)進行並獲得可靠的(de)實(shí)驗結果。