大多(duō)數(shù)細胞在
msc無血清培(péi)養基(jī)中單獨培(péi)養時都不能(néng)增殖
,它們需要補充額外的(de)生長因子和細胞因子
,如(rú)激素(sù)、轉(zhuǎn)運蛋白、微量(liàng)元素(sù)或ECM因子。激素(sù)如(rú)胰島素(sù)
、生長激素(sù)等胰島素(sù)作為一(yī)種多(duō)肽激素(sù)
,對哺乳動(dòng)物細胞具有多(duō)效合成作用
,促進葡萄糖和氨基(jī)酸攝取(qǔ)、脂肪生成、單價陽離(lí)子和磷酸轉(zhuǎn)運
、蛋白質和核酸合成。轉(zhuǎn)運蛋白
,如(rú)轉(zhuǎn)鐵蛋白
,轉(zhuǎn)鐵蛋白作為鐵的(de)載體(tǐ),也有助(zhù)於(yú)降低氧自(zì)由基(jī)和過(guò)氧化氫的(de)毒性水平
。ECM因子是某些貼壁(bì)生長細胞所(suǒ)必需的(de)組分
,如(rú)纖連(lián)蛋白、膠原蛋白
、層粘連(lián)蛋白等
。
下(xià)面為大家(jiā)分享(xiǎng)一(yī)下(xià)msc無血清培(péi)養基(jī)的(de)使用注意事項:
1、細胞培(péi)養用水一(yī)般為三(sān)蒸水(經石英(yīng)蒸餾器蒸餾)或超純水,生產上一(yī)般為注射用水。
2、建議盡量(liàng)選擇與(yǔ)所(suǒ)用量(liàng)相匹配(pèi)的(de)包裝一(yī)次使用
,因為包裝一(yī)旦打開,組分可能(néng)會變質或因受潮而結團。
3
、溶解乾粉培(péi)養基(jī)時先(xiān)加(jiā)入終(zhōng)體(tǐ)積90%-95%的(de)培(péi)養用水
,添加(jiā)劑加(jiā)完後再補足(zú)。
4、如(rú)需添加(jiā)的(de)組分較多(duō)時,某一(yī)組分*溶解後
,再添加(jiā)另一(yī)組分
。
5、待msc無血清培(péi)養基(jī)溶解後再加(jiā)入碳(tàn)酸氫鈉,以(yǐ)免(miǎn)產生沈澱
。
6
、所(suǒ)有成分溶解後,培(péi)養基(jī)應立即過(guò)濾或高(gāo)壓除菌,以(yǐ)免(miǎn)產生沈澱或有微生物污染。
7、在過(guò)濾除菌時
,一(yī)般情況下(xià)應調pH比所(suǒ)需值低0.1~0.2個單位
,因過(guò)濾除菌後
,pH值會升高(gāo)約0.2。
8
、在細胞培(péi)養過(guò)程中
,建議不加(jiā)或加(jiā)少量(liàng)的(de)抗生素(sù),如(rú)血清的(de)濃度(dù)較低則所(suǒ)加(jiā)抗生素(sù)的(de)量(liàng)也要相應降低一(yī)些
。
9、建議用1NHCl或1NNaOH來調節培(péi)養基(jī)的(de)pH,因為用碳(tàn)酸氫鈉來調對培(péi)養液(yè)的(de)滲(shèn)透壓影響比較大
。